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ELISA試劑盒可以采用的洗板方法有哪些?

瀏覽次數:862發(fā)布日期:2021-04-13
   ELISA試劑盒中的樣品都要做復孔或三孔,然后計算每個(gè)濃度規范品的均勻OD值,復孔的變異系數應該小于20%;制造規范曲線(xiàn);均勻OD值減去空白孔的OD值。以減去底后的OD值為X軸,規范品的濃度為Y軸,利用作圖軟件得出一個(gè)適宜的計算辦法。主張運用適宜的軟件來(lái)作圖,這款軟件能夠給出許多種辦法,并從中挑選一條適宜的方程,要想檢驗某條曲線(xiàn)是否與表中數據符合,能夠將規范品的濃度作為未知數,將對應的OD值帶入該方程,計算出規范品的濃度,得到的成果應該與實(shí)際濃度很接近。
  ELISA試劑盒洗板方法可以采用:
  手工洗板方法:吸去或甩掉酶標板內的液體,在實(shí)驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標板朝下用力拍幾次,將推薦的洗滌緩沖液至少0.4毫升注入孔內,浸泡1-2分鐘,根據需要,重復此過(guò)程數次。
  在儲存及孵育過(guò)程中避免將試劑暴露在強光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染,試劑避免受到微生物的污染,因為蛋白水解酶的干擾將導致出現錯誤的結果。
  自動(dòng)洗板:如果有自動(dòng)洗板機,應在熟練使用后再用到正式實(shí)驗過(guò)程中。
  濃洗滌液會(huì )有鹽析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。
  剛開(kāi)啟的酶標板孔中可能會(huì )有少許水樣物質(zhì),此為正?,F象,不會(huì )對實(shí)驗結果造成影響。
  ELISA試劑盒假如出現規范曲線(xiàn)的線(xiàn)性欠好,或平行性欠好(雙孔對照孔的OD值差別很大),或出現跳孔的現象,可能引起的原因有酶標板孔間相互污染、洗板后未能趕快進(jìn)行下一步操作、增加樣品或其它試劑時(shí)操作的辦法不對、孵育方位避光性不佳或蓋板膜沒(méi)有密封好使得水分蒸發(fā)、酶標板孔問(wèn)參加的試劑量不同,相對應的解決辦法是加樣時(shí)請當心勿將液體濺人另一孔中,人工洗板時(shí)也請當心,勿將洗滌液濺人另一微孔中、在洗板后及時(shí)進(jìn)行下一步操作、增加試劑時(shí)請懸空滴入,切記勿將槍頭接觸到板孔內,汲取不同試劑瓶中的液體時(shí)就要更換一次槍頭、承認孵育環(huán)境不透光,蓋板膜將酶標板密封好、運用已校正過(guò)的微量加樣器。
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