1. 自動(dòng)洗板機:每孔加入洗滌液350μl,注入與吸出間隔60秒。洗板5次。
2. 手工洗板:甩盡孔內液體,在潔凈的吸水紙上拍干,每孔加洗滌液350μl,浸泡1-2分鐘,吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內的液體,在厚的吸水紙上拍干。洗板5次。
實(shí)驗開(kāi)始前,各試劑均應平衡至室溫;試劑或樣品配制時(shí),均需充分混勻,并盡量避免起泡。
1.加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣時(shí)將樣品加于酶標板底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。給酶標板覆膜,37℃孵育2小時(shí)。為保證實(shí)驗結果有效性,每次實(shí)驗請使用新的標準品溶液。
2.棄去液體,甩干,每個(gè)孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內配制),酶標板加上覆膜,37℃溫育1小時(shí)。
3.棄去孔內液體,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分鐘,大約350μl /每孔,甩并在吸水紙上輕拍將孔內液體拍干。
干4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鐘內配制)100μl,加上覆膜,37℃溫育1小時(shí)。
5.棄去孔內液體,甩干,洗板5次,方法同步驟3。
6.每孔加底物溶液100μl,酶標板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據實(shí)際顯色情況酌情縮短或延長(cháng),但不可超過(guò)30分鐘。當標準孔出現明顯梯度時(shí),即可終止)。
7.每孔加終止液50μl,終止反應,此時(shí)藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。
8.立即用酶標儀在450nm波長(cháng)測量各孔的光密度(OD值)。應提前打開(kāi)酶標儀電源,預熱儀器,設置好檢測程序。
9.實(shí)驗完畢后將未用完的試劑按規定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結束。
ABCB7ATP結合蛋白家族7抗體
ASCL2ASCL2蛋白抗體
phospho-Ataxin 1(Ser775)磷酸化脊髓小腦失調癥蛋白1抗體
phospho-ATF1 (Ser63)磷酸化活化轉錄因子1抗體
phospho-ATF2 (Ser480)磷酸化活化復制因子2抗體
phospho-ATF2 (Thr51 + Thr53)磷酸化活化復制因子2抗體
phospho-ATF2 (Thr69 + Thr51)磷酸化活化復制因子2抗體
phospho-ATF2 (Thr73 + Thr55)磷酸化活化復制因子2抗體
phospho-ATF2 (Thr71 + Thr53)磷酸化活化復制因子2抗體
phospho-ATF2(Thr71)磷酸化活化復制因子2抗體
ATF5活化轉錄因子5抗體
ATF6 beta活化轉錄因子6β抗體
ATICAICAR甲?;D移酶抗體
phospho-ATM (Ser794)磷酸化毛細血管擴張性共濟失調癥突變蛋白抗體
ATP5EATP5E蛋白抗體
ATP5G2ATP5G2蛋白抗體
ATP6V0D2ATP6V0D2蛋白抗體
ATP6V1B2ATP6V1B2蛋白抗體
ATPIF1ATPIF1蛋白抗體
AttractinAttractin蛋白抗體
Phospho-Aurora B(Tyr12)磷酸化有絲分裂激酶B抗體
ARPM1肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白M1抗體
ABH1ALKB蛋白抗體
phospho-beta Actin (Tyr53)磷酸化β-肌動(dòng)蛋白抗體
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